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小液流法測定植物組織水勢技術分析
點擊次數:1298 更新時間:2017-01-21

小液流法測定植物組織水勢技術分析

一、 原理

TSZ Elisa試劑盒將植物組織分別放在一系列濃度遞增的溶液中,當找到某一濃度的溶液與植物組織之間水分保持動態平衡時,則可認為此植物組織的水勢等于該溶液的水勢。因溶液的濃度是已知的,可以根據公式算出其滲透壓,取其負值,為溶液的滲透勢(ψπ),即代表植物的水勢(ψw)(waterpotential)。

ψw=ψπ=-P=-CRT(大氣壓)

二、材料、儀器設備及試劑

(一)材料:小白菜、菠菜、油菜或其它作物葉片

(二)儀器設備:.帶塞小瓶2個;2.帶有橡皮管的注射針頭;3.鑷子;4.打孔器5.培養皿。

(三)試劑:.0.05、0.0、0.5、0.20、0.25、0.30mol/L蔗糖溶液;2.甲烯藍粉末。

三、實驗步驟

(一)取干燥潔凈的瓶6個為甲組,各瓶中分別加入0.05~0.30mol/L蔗糖溶液約4ml(約為瓶的2/3處),另取6個干燥潔凈的瓶為乙組,各瓶中分別加入0.05~0.30mol/L蔗糖溶液ml和微量甲烯藍粉末著色,上述各瓶加標簽注明濃度。

(二)取待測樣品的功能葉數片,TSZ Elisa試劑盒用打孔器打取小圓片約50片,放至培養皿中,混合均勻。用鑷子分別夾入5~8個小圓片到盛有不同濃度的甲烯藍蔗糖溶液的瓶中(乙組)。蓋上瓶塞,并使葉圓片全部浸沒于溶液中。放置約30~60min,為加速水分平衡,應經常搖動小瓶。

(三)經一定時間后,用注射針頭吸取乙組各瓶藍色糖液少許,將針頭插入對應濃度甲組瓶溶液中部,小心地放出少量液流,觀察藍色液流的升降動向。(每次測定均要用待測濃度的甲烯藍蔗糖溶液清洗幾次注射針頭)。如此方法檢查各瓶中液流的升降動向。若液流上升,說明浸過小圓片的蔗糖溶液濃度變小(即植物組織失水);表明葉片組織的水勢高于該濃度糖溶液的滲透勢;如果藍色液流下降則說明葉片組織的水勢低于該糖溶液的滲透勢,若藍色液流靜止不動,則說明葉片組織的水勢等于該糖溶液的滲透勢,此糖溶液的濃度即為葉片組織的等滲濃度

四、結果計算

將求得的等滲濃度值代入如下公式:

ψw=ψπ=-CRTi×.03×0.。式中:ψw=植物組織的水勢(單位:Mpa)ψπ=溶液的滲透勢C=等滲濃度(mol/L)R=氣體常數(0.00834MPa/L/mol/K)T=溫度i=解離系數(蔗糖=,CaCl2=2.60)大氣壓=.03=0.MPa。

【注意事項】

.TSZ Elisa試劑盒所取材料在植株上的部位要一致,打取葉圓片要避開主脈和傷口。

2.2取材以及打取葉圓片的過程操作要迅速,以免失水。

3.3帶有結晶水的甲烯藍不易溶于CaCl2溶液,可在00℃下烘干成無水甲烯藍粉末使用。

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