TSZ Elisa試劑盒溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現問題的步驟。通常目前國內ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘~小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ ~2小時才能有較*的結合,低于小時,可能會影響測定下限。因此,關于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:
要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,TSZ Elisa試劑盒通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HAg測定的室內質控中,測定由衛生部臨床檢驗中心供應的 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內溫度較低有關,此時微孔板轉入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應溶液醫學教育網中測量觀察TSZ Elisa試劑盒即可。